Indole産生を示すPrevotella melaninogenica類似菌の同定
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概要
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口腔から分離した黒色色素産生性偏性嫌気性グラム陰性桿菌(BPNR)を同定する際,第一次鑑別性状は, glucose発酵性である. この性状でasaccharolytic groupのPorphyromonas gingivalis, P. asaccharolyticusおよびP. endodontalisと他のBPNRとを区別することができる. ついで, lactoseとsucrose発酵性およびindole産生性が重要な鑑別性状となる. すなわち, lactose発酵菌のなかには, Prevotella loescheii, P. denticola, P.melaninogenica(P. melaninogenica group), Bacteroides macacaeおよびB.leviiが含まれる. 前3者と後2者とは, sucrose発酵性で区別される. Lactose非発酵菌としては, P. corporisとP. intermediaがあり, 両者はindole産生性で区別される. しかし, 口腔感染症や口腔常在菌叢から分離されるBPNRのなかで, glucose発酵性で, indole産生性を示すが, 他の生化学的性状から同定不能となる菌株がいくつかみられている. そこで, 本研究ではこれらの菌株をAPI ZYM systemやDNA-DNA hybridization法で同定するとともに, key性状を得る目的で, それぞれの菌種の形態, 表現形質, SDS-PAGEによる菌体タンパクパターンおよびplasmidの有無を検討した. 供試菌として上記の性状から同定不能となった小学生の唾液由来45株, 膿瘍由来6株および歯科衛生士学校実習生の唾液由来1株を用いた. API ZYMの結果では, 52株はすべてalkaline phosphatase, acid phosphatase, phosphoamidase, β-galactosidaseおよびN-acetyl-β-glucosaminidaseを産生し, P. melaninogenica groupと類似した酵素産生パターンを示した. DNA-DNA hybridizationの結果, 52株中, 24株がP. melaninogenica, 23株がP. denticola, 5株がP. loescheiiと同定された. したがって, glucose発酵性で, indole産生性のBPNRを同定する際には注意を要する. 生化学的性状試験とAPI ZYMで, P. melaninogenica group3菌種を鑑別することはできなかった. それゆえ, 菌体表層構造, plasmidの有無について検討した. Negative染色で菌体表層に線毛様構造を有するものは, P. denticolaに5株, P.melaninogenicaに3株およびP. loescheiiに1株みられた. 粘性物質産生菌はP. denticolaとP. loescheiiにそれぞれ5株およびP. melaninogenicaに4株みられた. Plasmid検索の結果, P. denticola CS29とP. melaninogenica CS37では, それぞれ6.2kb付近に1本のbandが観察された. また, P. denticola ATCC 35308には6.2kbと30kb付近に2本のbandが観察された. しかし, 菌種間で相違は認められなかった. さらに, 病原性状と関連が深い, β-lactamase, DNase, hyaluronidase, chondroitin sulfatase, lecithinase, lipase, collagenase, trypsin, chymotrypsinおよび粘性物質産生性にも菌種間で鑑別できる特徴は認められなかった. しかし, SDS-PAGEでは, P. loescheiiと他の2菌種とが区別された. 以上の結果から, 臨床から分離されるBPNRのなかには, 初代培養でindole産生を示すP. melaninogenica groupが多数存在することが明らかとなった. これらの菌種を他のBPNRと鑑別する際には, glucose, lactoseおよびsucrose発酵性が重要である. また, P. loescheiiと他の2菌種との鑑別にはSDS-PAGEが有用であり, P. melaninogenicaとP. denticolaの鑑別にはDNA-DNA hybridizationが必要であると考えられる.
- 大阪歯科学会の論文
- 1993-08-25
著者
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