ヒト歯髄組織における骨形成タンパク質の発現
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概要
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歯髄は近年、硬組織や神経組織の再生に利用可能な生物資源として注目されるようになってきた。本研究では、ヒト歯髄におけるBMPのmRNAとタンパク質の発現状態を調べた。成人の第三大臼歯から摘出した歯髄の全RNAを用いてRT-PCRをおこなったところBMP-2,-4,-6,-7mRNAの発現が認められた。加えて硬組織関連遺伝子であるalkaline phosphatase (ALP), osteocalcin (OCN), osteopontin(OPN), dentin sialoprotein (DSP),およびdentin matrix protein 1 (DMP1), ImRNAの発現も認められた。一方、歯髄のSDS溶解液に対し抗BMP-2抗体を用いて免疫プロット解析したところ、分子量50kDaのメインバンドと、32ないし16kDaの位置にマイナーバンドが現れた。そこでFLAG標識したBMP-2の融合タンパク質を発現するプラスミドを構築し、COS-7細胞に発現させた。COS-7細胞のSDS溶解液は、抗FLAG抗体と抗BMP-2抗体を用いた免疫プロット解析の結果、どちらも62kDaにメインバンドが検出された。これらの結果は、抗BMP-2抗体がヒトBMP-2を特異的に認識すること、そして生理的なヒト歯髄組織において、BMP-2の大部分は分子量50kDaの高分子量前駆体として存在することを示唆している。そこでFLAG標識したBMP-2の融合タンパク質を発現するプラスミドを構築し,COS-7細胞に発現させた。COS-7細胞のSDS溶解液は、抗FLAG抗体と抗BMP-2抗体を用いた免疫プロット解析の結果、どちらも62kDaにメインバンドが検出された。これらの結果は、抗BMP-2抗体がヒトBMP-2を特異的に認識すること、そして生理的なヒト歯髄組織において、BMP-2の大部分は分子量50kDaの高分子量前駆体として存在することを示唆している。
著者
-
有末 眞
北海道医療大学歯学部顎顔面口腔外科学分野
-
伊藤 勝敏
北海道医療大学歯学部顎顔面口腔外科学分野
-
村田 勝
北海道医療大学歯学部生体機能・病態学系顎顔面口腔外科学分野
-
荒川 俊哉
北海道医療大学歯学部口腔生化学講座
-
田隈 泰信
北海道医療大学歯学部口腔生化学講座
-
安彦 善裕
北医療大歯口腔病理
-
安彦 善裕
東京歯科大学
-
安彦 善裕
北海道医療大学
-
有末 眞
北海道医療大学歯学部生体機能・病態学系顎顔面口腔外科学分野
-
有末 眞
北海道医療大学 歯学部 歯科補綴学 第一講座
-
有末 眞
北海道医療大学歯学部口腔外科学第二講座
-
有末 眞
北海道医療大学 歯学部 口腔病理学 講座
-
安彦 善弘
北医療大歯口腔病理
-
安彦 善裕
北海道医療大学歯学部口腔病理学講座
-
村田 勝
北海道医療大学歯学部口腔外科第2講座
-
村田 勝
岡山大学口腔病理学
-
伊藤 勝敏
北海道医療大学歯学部生体機能・病態学系顎顔面口腔外科学分野
-
田隈 泰信
北海道医療大学歯学部口腔生物学系生化学分野
-
田隈 泰信
北海道医療大学 歯 小児歯科
-
田隈 泰信
北海道医療大学歯学部航空生化学講座
-
安彦 善裕
北海道医療大学個体差医療センター歯学部門口腔内科学分野
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