Expression, purification and biochemical characterization of the cytoplasmic loop of PomA, a stator component of the Na+ driven flagellar motor
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概要
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Flagellar motors embedded in bacterial membranes are molecular machines powered by specific ion flows. Each motor is composed of a stator and a rotor and the interactions of those components are believed to generate the torque. Na+ influx through the PomA/PomB stator complex of Vibrio alginolyticus is coupled to torque generation and is speculated to trigger structural changes in the cytoplasmic domain of PomA that interacts with a rotor protein in the C-ring, FliG, to drive the rotation. In this study, we tried to overproduce the cytoplasmic loop of PomA (PomA-Loop), but it was insoluble. Thus, we made a fusion protein with a small soluble tag (GB1) which allowed us to express and characterize the recombinant protein. The structure of the PomA-Loop seems to be very elongated or has a loose tertiary structure. When the PomA-Loop protein was produced in E. coli, a slight dominant effect was observed on motility. We conclude that the cytoplasmic loop alone retains a certain function.
著者
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Sudo Yuki
Division Of Biological Science Graduate School Of Science Nagoya University
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麻見 安雄
国立医薬品食品衛生研究所・変異遺伝部
-
Homma Michio
Division Of Biological Science Graduate School Of Science Nagoya Univ
-
Yoshizumi Rei
Division of Biological Science, Graduate School of Science, Nagoya University
-
Yoshizumi Rei
Division Of Biological Science Graduate School Of Science Nagoya Univ.
-
Asami Yasuo
TA Instruments Japan, Inc.
-
Kojima Chojiro
Laboratory Of Biophysics Department Of Molecular Biology Nara Institute Of Science And Technology
-
Kojima Seiji
Division Of Biological Science Graduate School Of Science Nagoya University
-
Asami Yasuo
Ta Instruments Japan
-
Asami Yasuo
Div. Genetics & Mutagenesis Nihs
-
Gohara Mizuki
Division of Biological Science, Graduate School of Science, Nagoya University
-
Gohara Mizuki
Division Of Biological Science Graduate School Of Science Nagoya University
-
Kobayashi Shiori
Division Of Biological Science Graduate School Of Science Nagoya University
-
Hayashi Kokoro
Laboratory of Biophysics, Graduate School of Biological Sciences, Nara Institute of Science and Technology
-
Kojima Chojiro
Laboratory of Biophysics, Graduate School of Biological Sciences, Nara Institute of Science and Technology
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