心筋エクトヌクレオチダーゼ活性のin vivo計測と病態生理学的意義

概要

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マイクロダイアリシス法を用い，ラット心筋における組織間液中アデノシン濃度を測定した．アデノシンの濃度は 260 nmによる紫外可視分光器を導入した高速液体クロマトグラフ（HPLC）法により測定した．AMP（100 μM）を灌流するとアデノシンの濃度は〜 9 μMまで上昇し，定常状態となる．エクト-5-ヌクレオチダーゼの特異的阻害薬であるα，β-メチレンアデノシン5-ジホスフェイト（AOPCP）100 μMを灌流させるとアデノシンの濃度は〜 0.5 μMにまで低下するが，AOPCPを取り除くとアデノシンの濃度は回復する．AMP（10〜 1,000 μM）をマイクロダイアリシスプローブ中に灌流させると濃度依存性にアデノシン産生量は増加し，ラット心筋を用いた場合その Km値は 107.2 μMであった．この値はサイトソリック-5-ヌクレオチダーゼ（3mM）に比べてかなり小さく，エクト-5-ヌクレオチダーゼ（20 μM）に近い値を示した．このように 100 μM AMP灌流下で得られるアデノシンの濃度は，エクト-5-ヌクレオチダーゼの活性を反映している．