ラット動脈壁コレステロール代謝におけるSterol Carrier Protein 2の関与
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概要
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生体内の種々のコレステロール代謝において重要な役割を果たすことが明らかにされている細胞内脂質転送蛋白の一種であるsterol carrier protein 2 (SCP2)のラット動脈壁における存在,およびそのコレステロール代謝における役割について検討を加えた。ラット肝臓ホモジネートの105,000×g可溶性分画より精製したSCP2を抗原として家兎を用い抗体を作成,SCP2をリガンドとしたアフィニティカラムにより特異的抗SCP2-IgG抗体を精製した。これを一次抗体とし,二次抗体には^<125>I-抗家兎IgG抗体を用いた高感度Western blot法によりラット動脈壁中のSCP2の存在を検討した。その結果動脈壁可溶性画分中に精製SCP2と分子量および抗原性において同一の蛋白が存在する事が確認された。このWestern blot分析ではSCP2以外に分子量58KDaの蛋白が認識された。このSCP2と交叉する蛋白を熱処理により除去する方法を確立し,enzyme immunoassay (EIA)によるSCP2の微量定量法を確立した。EIAによりラット動脈壁の各細胞画分におけるSCP2様蛋白の含量を求めた結果,可溶性画分に最も多く分布した。また精製SCP2をラット動脈壁ミクロソーム画分に添加し,acyl-CoA: cholesterol acyltransferase (ACAT)による〔^<14>C〕コレステロールからコレステロールエステルの産生に及ぼす影響を検討した。その結果ACATによるエステル化反応はSCP2の添加により用量依存性および時間依存性に増大した。以上の成績より,ラッと動脈壁にはSCP2様蛋白が存在し,細胞内脂質転送蛋白としてACATによるコレステロールエステル産生に関与する可能性が示唆された。
- 千葉大学の論文
- 1990-08-01
著者
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