ハイブリドーマ連続培養の細胞分子生物学的解析とインターロイキン-6を用いたモノクローナル抗体の効率的な生産法
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概要
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灌流培養の本質を解明する試みとして, 灌流培養中の細胞の状態を分子生物学的手法で解析した.重力沈降型灌流培養装置を用いたハイブリドーマ細胞培養において.細胞密度がほほ一定となる定常域の細胞を回分培養の対数増殖期の細胞と比較すると抗体産生能は2〜3倍に向上にし, γ<SUB>1</SUB>鎖 (抗体) mRNAの全RNAに対する比が1.7倍に向上していた.また, DNA中へのチミジン取り込み速度より算定した細胞の増殖速度は1/2〜1/3に低下していた.フローサイトメトリーによる細胞周期解析が, この増殖速度の低下は細胞周期のG<SUB>0</SUB>/G<SUB>1</SUB>期停止であると定性的に示した.また灌流培養定常域の培地中のアンモニア, 乳酸, ブドウ糖の濃度は回分培養末期の細胞密度定常域のそれらの濃度とほぼ一致していた.この灌流培養系にインターロイキン-6 (IL-6) を添加したところ, 更に抗体産生能が向上し, IL-6無添加の回分培養の5〜7倍となった.
- 社団法人 化学工学会の論文
著者
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寺田 聡
福井大学
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寺田 聡
福井大工・生応化
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鈴木 栄二
東京大学工学系
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寺田 聡
東京大学工学部 化学工学科
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森田 晴彦
東京大学工学部 化学工学科
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牧島 房夫
東京大学工学部 化学工学科
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高松 博幸
帝人 (株) 生物工学研究所
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