凍結牛体外受精由来胚の生存性に及ぼす融解速度の影響
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概要
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牛体外受精由来胚をI法では，1.4 Mグリセロールを含む0.2 Mシュクロース加20%牛胎児血清添加修正リン酸緩衝液(修正PBS)，II法では，1.6 M 1, 2-プロパンジオール加修正PBS，III法では1.8エチチレングリコール加修正PBSを保存液として凍結保存し，融解速度が胚の生存性に及ぼす影響について検討した．I法では，ストロー内の胚(5個/ストロー)を含む液層(5〜10 mm)の両端を空気層(3〜5 mm)を介し0.2Mシュクロースで満たし，II法は同様に両端を0.3Mシュクロースで満たした．III法は全ての液層を保存液で充填した．胚を含むストローを−25〜−30 Cまで緩慢に冷却し，液体窒素中で凍結保存した．ストローは，液体窒素中から直接10，20，30，40，50 Cの温水に移し，ストロー内の氷晶の消失を確認後直ちに，中味をシャーレに取り出し，胚は卵丘細胞と共培養して，胞胚腔回復率(生存率)及び脱殻胚盤胞までの発育率を比較した．I法での生存率は，融解速度による差は認められなかったが，発育率において，10 C区(462 C/分)で低値を示し(32%)，融解速度が高くなるにつれて発育率も増加した．II法では，20 C区(876 C/分)の生存率および発育率がそれぞれ94%，77%で，他の区に比べ有意に(P<0.05)高かった．III法では融解速度に関わらず高い生存率(82〜94%)および発育率(73〜91%)が得られ，融解速度による差は認められなかった．
- 日本繁殖生物学会の論文
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