Possible usage of the firefly luciferase gene as a gene expression marker in preimplantation embryos from transgenic mice
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概要
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継続後誌:近畿大学先端技術総合研究所紀要 = Memoirs of Institute of Advanced Technology, Kinki UniversityWe created three lines of transgenic mice by introducing the firefly luciferase cDNA fused to the chicken cytoskeletal β-actin promoter into mouse embryos. The transgenic mice exhibited luciferase activity in all the tissues examined, which indicated that the luciferase gene is expressed efficiently under the control of chicken β-actin promoter. The transgenic mice did not show any detectable abnormalities in appearance or behavior. Using photoncounting imaging, luciferase activity was confirmed in all transgenic morulae (16/16) by detecting emitted light as the accumulating photon. Development of live young after the transfer of analyzed morulae was 56％ (9 /16), which was not significantly different from 60％ (15/25) development rate of normal ones to live mice. These findings indicate that the luciferase gene serves as a useful marker for in viva gene expression studies in preimplantation embryo development. Furthermore, these transgenic mice may provide transgenic cells labeled with luciferase gene in the studies such as those of cell lineage and cell transfer. (和文) 本研究において、ニワトリ・β-アクチン転写調節領域とホタル・ルシフェラーゼcDNAの融合遺伝子を導入したトランスジェニックマウスを3系統作製することができた。いずれの系統のトランスジェニックマウスおいても、調べた限りすべての組織でルシフェラーゼ活性が観察され、導入遺伝子が構成的に全身性の発現をしていることが示された。また、形態的な異常は全てのトランスジェニックマウスで観察されず、このことからルシフェラーゼは個体に対し毒性を持たない蛋白質であることが明らかになった。一方、シングルフォトン・イメージングシステムを用いることによって、初期発生胚におけるルシフェラーゼ遺伝子発現を細胞が生きたままの状態で観察できること、さらに検定した初期胚を移植したところ正常な個体まで発生することが明らかになった。以上のことより、ルシフェラーゼ遺伝子は、初期胚での遺伝子発現検定に有効なマーカー遺伝子であることが示唆された。また、本実験で作製されたトランスジェニックマウスは、そのほぼ全ての細胞がマーカー遺伝子で標識されており、細胞系列などの研究領域で利用可能であると考えられた。
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