ポリエトキシシランを含むXBridgeカラムを用いたp-アミノ安息香酸メチルエステル化D-アロースとD-アルトロース分析のための高速液体クロマトグラフィー
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概要
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希少糖であるD-アロース(グルコースのC-3エピマー)を含む4種のアルドヘキソースをp-アミノ安息香酸メチルエステル (ABEE) 化し,2種の逆相シリカカラムを用いて0.2Mホウ酸カリウム緩衝液(pH 8.9)とアセトニトリル(93:7)を溶出液とした高速液体クロマトグラフィー (HPLC) で蛍光検出器(励起波長 305 nm,測定波長 360 nm)を用いて分析した.Cosmosil ARカラムでは,分子量が同一な4種のアルドヘキソースはガラクトース,マンノース,アロース,グルコースの順に溶出したが,マンノース,アロースとグルコースの相互の分離は不完全であった.それに対してポリエトキシシランを含むXBridgeカラムを用いると,4種の糖は相互にシャープなピークとして完全に分離した.各々の糖はUV検出器(305 nm)では 0.5 nmol (90 ng) 以上, 蛍光検出器では1 pmol (0.18 ng) 以上が十分検出できた.さらに,XBridgeカラムを用いたHPLC分析でABEE標識した希少糖であるD-アルトロース(グルコースのC-2とC-3エピマー)はガラクトースとマンノースの間の位置に溶出した.ここで示したHPLC分析は簡単で信頼性があるので,動物血清や植物細胞のような生体試料中での微量なD-アロースやD-アルトロースの同定や定量に応用可能である.
- 2008-02-22
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