Sp-family(sp1/sp3)によるVII型コラーゲン遺伝子の転写調節機構について
スポンサーリンク
概要
- 論文の詳細を見る
VII型コラーゲンは表皮角化細胞と真皮線維芽細胞で生合成され,基底膜領域のアンカーリングフィブリルを形成し,基底膜と真皮の結合を強固にして皮膚の構築を維持している。VII型コラーゲン遺伝子(COL7A1)の転写調節機構に関し,1)COL7A1はTATA boxとOCAAT boxを欠く,2)転写開始点の上流-512/-505のプロモーター領域に存在するGT boxがCOL7Alの転写のcis-acting elementであり,この領域には転写因子Splが結合することがこれまで明らかになっている。しかしこのGT boxを欠失させても,その転写活性はかなり低下するが完全には消失しない。そこで今回我々は,COL7A1の転写に関わる更なるcis-acting element及びtrans-acting factorの存在を予想してCOL7A1のプロモーター領域を更に解析した。-1804/+92のプロモーター領域が挿入されたルシフェラーゼベクター(-1804COL7A1/Luc)とその欠失変異体を培養表皮角化細胞及び真皮線維芽細胞にそれぞれ導入し,ルシフェラーゼアッセイ法を行った結果,-230/-144の領域もCOL7A1の基本転写に重要なことが明らかになった。この領域をプローブにしてゲルシフトアッセイ法を行うと,両細胞とも核タンパク質/プローブ複合体の4種類のバンド(移動度の遅い方からshift-1,-2,-3,-4)が検出された。既知転写因子のコンセンサスオリゴを用いた干渉実験で,Sp1のコンセンサスオリゴの添加は各バンドを消失させ,ゲルスーパーシフトアッセイ法ではshift-1にSp1,shift-2,-3,-4にSp3が結合し得ることが示された。そこでコンピューター解析でこの領域を詳細に解析すると,Sp1結合部位の可能性があるGC boxが2ヶ所存在した(-169/-162(boxA),155/-150(boxB))。そこで-524COL7A1/Lucベクターの各boxに変異を導入してルシフェラーゼアッセイ法を行うと,boxAに変異を入れた場合は明らかな活性の低下は無く,boxBで60%,boxAとBの両方では更に45%に低下した。しかもGT boxを含むすべてのboxに変異を導入すると活性は20%にまで低下した。最後にSp1とSp3の発現ベクターを,これらの活性の持たないDrosophila SL2細胞に,-177COL7A1/Lucと共に導入した結果Sp1はCOL7A1の転写を活性化し,Sp3はSp1の作用を抑制した。以上から,表皮角化細胞と真皮線維芽細胞におけるCOL7A1の基本転写は共に,Sp-family(Sp1,Sp3)が各GT/GC boxに結合することで調節を受けていた。しかもGT/GC boxすべてに変異を導入しても転写活性が依然検出されることは,更に未知のcis-acting elementの存在することと,各boxが転写のイニシエーションには関与していない可能性が示唆された。
- 日本結合組織学会の論文
著者
-
今 淳
弘前大学大学院医学研究科 附属高度先進医学研究センター・糖鎖工学講座
-
花田 勝美
弘前大学大学院医学研究科
-
花田 勝美
弘前大学医学部
-
佐々木 秀之
弘前大学医学部皮膚科学講座
-
今 淳
弘前大学医学部皮膚科学講座
-
花田 勝美
弘前大学 皮膚科学教室
-
花田 勝美
弘前大医
-
今 淳
弘前大学医学部医学科生化学第一講座
-
武田 仁志
弘前大学医学部皮膚科教室
-
今 淳
こんあつし建築設計事務所
-
今 淳
弘前大学糖鎖工学
-
花田 勝美
弘前大学医学部皮膚科
関連論文
- ヒアルロン酸ノックダウンマウスの開発および病態解析への適用
- スキンケアロボット
- 体内において溶解する薬剤配送システムとしてのマイクロ糖針
- アトピー性皮膚炎に対する転写因子NFκBデコイDNA軟膏の臨床研究(シンポジウム4 アトピー性皮膚炎治療の進歩)
- 石灰やけ
- うるしかぶれ
- 蜂刺症
- 座瘡患者における多核白血球の遊走能及びスーパーオキサイド産生能
- 皮膚組織内亜鉛の定量-2-部位別および層別皮膚亜鉛含有量
- 優性栄養型表皮水疱症における臨床型と遺伝子型の関連
- 230-kD類天疱瘡抗原発現に対するTGF-βの抑制効果
- 表在性色素異常症に対するルビーレーザーならびに美白剤外用の併用効果 : コラージュホワイトニングクリームの色素再生抑制
- Hallopeau-Siemens型劣性栄養障害型表皮水疱症における新規COL7A1ミスセンス変異
- 紫外線誘導しわ形成に対するサンスクリーン製剤の迅速評価法の開発 (特集 メディカル・バイオ)
- グルタチオンS-トランスフェラ-ゼπの現状と展望 (特集/生体成分の開発と応用) -- (第2章 糖質の開発と応用)
- マダニの人体刺咬症例について
- ラミニン5のγ2鎖遺伝子(LAMC2)のtransforming growth factor-β(TGF-β)による転写調節機構について
- 皮膚微小循環とその障害 (特集 微小循環障害) -- (臓器微小循環とその障害:メカニズムから治療まで)
- 光老化 (1) 表皮の変化
- A4 コラーゲンゲル三次元培養における軟骨由来プロテオグリカンが軟骨細胞に与える影響(第36回日本結合組織学会学術大会)
- 共培養法により明らかになった乾癬における表皮細胞-線維芽細胞の相互作用の変化
- 23148 東北地方の既存RC造建物の耐震診断および耐震補強に関する調査研究 : その4-コンクリート強度の分布
- 1P1-2F-C3 スキンケアロボットの提案
- メタルハライドランプを用いた光線力学診断および療法兼用光源装置
- P-6 藍由来アトピー性皮膚炎治療薬Tryptanthrinの免疫応答に及ぼす影響(ポスター発表の部)
- 経皮性薬剤配送システムとしてのマイクロ糖針
- 金属代謝異常症・ビタミン欠乏症
- 表皮角化細胞及び真皮線維芽細胞における,VII型コラーゲン遺伝子の発現調節機構について
- 乾燥性皮膚に対する濃縮海水ミネラル成分(オリゴマリン^【○!R】)配合スキンケア製剤の安全性および有用性の検討
- 光線・紫外線について
- 皮膚の紫外線防御機構
- DP-118-7 胸膜悪性中皮腫細胞に対する新規化学療法の可能性(第108回日本外科学会定期学術集会)
- 皮膚の病態形成機構に関する分子生物学的および糖鎖生物学的研究 : 正常な再生・修復とアンチエイジング(抗加齢) [平成18年度(第11回)弘前大学医学部学術賞特別賞受賞研究課題]
- コンドロイチン硫酸を低分子化するウサギ肝臓のエンド型グリコシダーゼ
- 症例報告 Multicentric reticulohistiocytosisの1例
- Sp-family(sp1/sp3)によるVII型コラーゲン遺伝子の転写調節機構について
- 炎症性サイトカイン(TNF-α,IL-1β)による,表皮角化細胞特異的なVII型コラーゲン遺伝子(COL7A1)発現調節機構
- 紫外線防御化粧品開発の最前線--臨床応用と将来の展望
- 2,3皮膚疾患に対する亜鉛療法の試み
- 掌蹠膿疱症における塩化ナトリウムの関与
- 皮膚組織内亜鉛の定量-1-低温灰化法の検討
- 太陽紫外線とは (特集・紫外線と皮膚)
- 第32回日本香粧品学会(2007)・会頭講演 光老化研究の変遷
- 赤川河口砂州の変形について
- 光老化 : 今日の話題
- 光老化 : ほんとうにしわ, しみは不要か
- サンバーン細胞
- 紫外線による皮膚の免疫抑制と治療への応用
- 乾癬鱗屑の光沢--比較生物学的考察
- 色素細胞主としてMelanophoreの発生学的観察および末梢神経との関連性について 第2編 Melanophoreの発生および末梢神経との関連性
- 色素細胞主としてMelanophoreの発生学的観察および末梢神経との関連性について 第1編 末梢神経におけるCholinesteraseの局在
- レダコ-トクリ-ム(新基剤)による2,3皮膚疾患の治験
- 紫外線と皮膚の劣化について--細胞レベルでの基礎的理解
- 瀰漫性肉芽腫性間質性肺炎を伴った広範いれずみの2例
- Pilonidal Sinusの発生病理に関する実験的考察
- 光老化とシワに関与するVII型コラーゲン遺伝子 (特集/シワのメカニズムとその対策)
- 紫外線(UVB)防御における皮膚メタロチオネインの役割 : メタロチオネイン・ノックアウトマウスにおける検討
- 1A2-K06 スキンケアロボットによる塗布作業(医療・福祉ロボティクス・メカトロニクス)
- 1A1-A15 スキンケアロボットの開発
- Systemic sarcoidal reaction and uveitis complicating cutaneous tatooing -A case report-
- 症例報告 顔面に生じたeccrine poromaの1例
- 有棘細胞癌におけるinvolucrinの免疫組織化学的局在の検索―組織学的悪性度分類および組織学的鑑別診断における有用性について―
- 成人型アトピー性皮膚炎に対する紫外線（UVA+UVB）コンビネーション療法
- 今月の症例 手背に生じた皮膚腺病の1例
- ヘアレスラットにおけるマグネシウム欠乏性皮膚炎の組織学的観察
- 2, 3皮膚疾患に対する亜鉛療法の試み