生理的イオン強度下でのショ糖勾配遠心法とRNAゲル電気泳動法を用いたマウス胚様体(OTT6050) U-snRNPの沈降特性に関する研究
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概要
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マウス胚様体核抽出液のショ糖勾配遠心法(5-20%)とRNAゲル電気泳動法による分画実験でU-snRNP (U1a, U1b, U2, U4, U5とU6-snRNP)は4-18s領域を中心として沈降するが,一部はグラジェントの広い領域に渡っても沈降する事が明らかとなった.これは胚様体U-snRNPは大きなリボ核蛋白質複合体(large nuclear RNP)から遊離した状態で存在する部分とassociateした状態で存在する部分がある事を示唆している.また分画されたグラジェントのフラクション間で,U-snRNPのそれぞれの分子種の相対量に関して差異が認められた.更にこれらすべてのU-snRNP分子種が15-40%/50%ショ糖勾配遠心法でチューブの底に近い領域(≧60s)で検出され,larger nuclear RNPとassociateしている事が示唆された.ミトコンドリア除去後の細胞質画分を用いた同様の実験で,水溶液中での細胞分画の際の核分画からのU-snRNPの漏出が示唆されたが,U-snRNPの特定の分子種に関する特異的な漏出は認められなかった.他の細胞系で「UsnRNA前駆体がまず細胞質に現われる」事が報告されているが,この前駆体に相当するかもしれないU1a/bとU2 snRNAよりそれぞれ長いいくつかの胚様体RNA分子種が細胞質画分をショ糖勾配遠心法で分画した際のいくつかのフラクション中で多量に検出された.また生理的イオン強度下でこの様な沈降特性を観察する事の重要性について考察した.
- 社団法人日本獣医学会の論文
- 1989-04-15
著者
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