Studies on Saccharogenic Amylase Produced by Aspergillus awamori : (IV) Purification and General Properties of Acid-stable Saccharogenic Amylase
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概要
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前報において, Aspergillus awamori var. fumeus-1-B42 菌の糖化型アミラーゼ系は, 培養pHを変えた場合の生成状態および DEAE-cellulose chromatography の挙動から考えて, 耐酸性の異なった二種類の糖化型アミラーゼからなることを認め, これらをそれぞれ「耐酸性糖化型アミラーゼ」, 「弱耐酸性糖化型アミラーゼ」と呼ぶことと報告した. その後、 これら二種類の糖化型アミラーゼの種々の差異を検討する目的で, これらの精製鈍化をおこなっている. 本報では, 「耐酸性糖化アミラーゼ」 についてこれを鈍化することができたので, その方法および精製酵素の若干の性質について報告する.pH 2.0〜2.5で培養してえられる培養濾液をpH 4.0〜5.0 で5%の酸性白土で処理した後, アセトン沈殿(35〜55%), 硫安塩析 (0.45〜0.75飽和), リバノール沈殿をおこない, ついで溶出 pH を変えた DEAE-cellulose chromatography をおこない, pH 5.4〜4.0で溶出する耐酸性糖化型アミラーゼ区分を集め, さらにKCl 濃度を変えた DEAE-cellulose chromatography をおこない, 液化型アミラーゼを全く含まない KCl0.19〜0.24Mで溶出する区分を集め, 最後にアセトン沈殿 (40〜50%) をおこない, 精製耐酸性糖化型アミラーゼ標品をえた.本標品は超遠心法および Tiselius 電気泳動法により均一であることが確認された.本アミラーゼは280 mμ に最大吸収をもつ蛋白質特由の紫外線吸収曲線を示した.本アミラーゼの安定 pH 範囲は2.4〜7.5,最適作用 pH は4.5〜4.6,熱に対しては40℃以下では安定であり, 65℃ではほとんど完全に失活する. (昭40.6.19受付)
- 社団法人日本生物工学会の論文
- 1965-11-25
著者
-
Fukimbara Takashi
The Institute of Physical and Chemical Research
-
Watanabe Kazuho
The Institute of Physical and Chemical Research
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渡部 一穂
The Institute of Physical and Chemical Research
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