細菌類のポリアミン抽出とHPLC分析

概要

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真正細菌と古細菌(本稿では両者を合わせて細菌類とする)の培養菌体からポリアミン画分を抽出し,ポリアミン成分の分析を行なうことで,細菌類のポリアミン構成が明らかとなる。ポリアミン構成は化学分類マーカーとして細菌類の系統分類に重要である。培養菌体からの過塩素酸によるポリアミン画分の抽出方法を検討し,高性能液体クロマトグラフィー(HPLC)法によるポリアミン分析法を開発した。日立L6000高速液体クロマトグラフ装置を用い,強酸性陽イオン交換樹脂力ラムによるイオン交換法で,カラム温度70℃で,NaCl直線濃度勾配/クエン酸緩衝液の溶離液による溶出を検討した。また,o-フタルアルデヒドによるポストラベル法による蛍光検出法を採用した。5%過塩素酸抽出画分を直接試料とすることができ,直鎖型のジアミンからヘキサアミンや分岐型四級ペンタアミンの他,アセチル化ポリアミン,水酸化ポリアミン,グアニジノアミン,芳香族アミンなど,細菌類のポリアミン画分に抽出されるアミン類を分離・分析するHPLC条件を確立した。